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PCR技术对于分子诊断有什么贡献??


Mullis与上世纪80年代发明了PCR技术之后,PCR在生物科学和医学诊断中都发挥了巨大的作用。在SARS爆发后第一个试剂盒也是基于PCR技术,那么在P优艾设计网_Photoshop论坛CR技术发明之后,有哪些PCR技术值得我们关注?
qkoufu0199 2021-11-12 10:51

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聚合酶链式反应(PCR)可对特定基因进行扩增,因此被广泛应用于获取特定基因或基因片段及临床基因诊断等领域.聚合酶链式反应(PCR)技术发明至今已近20年了,近年来出现的荧光定量PCR实现了PCR从定性到定量的飞跃,它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具.实时荧光PCR作为新一代分子生物学研究工具,已成为分子诊断、临床检验以及基础生物医学研究的主流技术平台,广泛应用于传染病、肿瘤、遗传病、心血管等疾病的分子诊断。


wujiani123 优艾设计网_电脑技术 2021-11-12 11:00


分子诊断是当代医学发展的重要前沿领域之一,其核心技术是基因诊断,常规技术包括:
(1)聚合酶链式反应(PCR);
(2)DNA测序(DNA sequencing);
(3)荧光原位杂交技术(FISH);
(4)DNA印迹技术( DNA blotting );
(5)单核苷酸多态性(SNP);
(6)连接酶链反应(LCR);
(7)基因芯片技术(gene chip)。
PCR产品灵敏度高、特异性强、诊断窗口期短,可进行定性、定量检测,可广泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等,填补了早期免疫检测窗口期的检测空白,为早期诊断、早期治疗、安全用血提供了有效的帮助。


草成2012 2021-11-12 11:00


聚合酶链式反应(PCR)是一种基础技术,对于分子优艾设计网_PS交流诊断我觉得是具有决定性的,没有PCR,分子诊断也不知从何说起,PCR为分子诊断提供了技术和理论支持,其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快,分子诊断需要的就是吸收这些优良特点,加以改进应用


kev****62 优艾设计网_PS问答 2021-11-12 11:04


PCR技术在分子诊断上的应用:
1)感染性疾病的分子诊断
定性或定量的检测致病微生物的核酸,已经用于病毒、细菌和寄生虫感染的诊断。
2)单基因遗传性疾病的基因诊断
3)多基因病的相关基因的诊断
4)肿瘤相关基因的分子诊断、
5)移植配型和法医学上的应用


M33****7602 2021-11-12 11:05


感谢 @youyuxing188 的邀请。

我个人认为,PCR对于分子诊断的贡献才刚刚开始,这是因为:
我们目前对于PCR反应的认识比较粗狂,PCR实验还做不到如同控制计算机一样精确。对于PCR反应中背景DNA、阳离子、阴离子以及各种二级结构中间体如何影响PCR反应的了解还处于黑匣子阶段,更不要说精确预测和控制。好在当前各种组学、结构等方面的发展较为迅速,为我们深刻理解PCR反应的精细过程提供了可能。PCR变种技术将发挥更大作用。实时定量PCR目前应用较为广泛,数字PCR的定量能力让人叹服,ARMS的对突变优艾设计网_设计百科检测高选择性,结合了二代测序的高通量多重PCR,LAMP的便捷等,不同变种有不同的长处,可以预见,将有更多地变种技术发展出来。PCR结果鉴定技术也在快速发展之中。经典的凝胶电泳,荧光,分辨率极高的毛细管电泳,还有二代测序等技术也将极大提高PCR技术的应用范围和深度。

PCR在理论与技术层面都需要更多地研究和实践,一直以来在实践方面做的倒是很多,但在理论分析方面可能因为不是研究热门,发不了大文章,鲜有人从事这一领域。

个人拙见,抛砖引玉。


u_104613656 2021-11-12 11:14


分子诊断是当代医学发展的重要前沿领域之一,其核心技术是基因诊断,常规技术包括:
(1)聚合酶链式反应(PCR);
(2)DNA测序(DNA sequencing);
(3)荧光原位杂交技术(FISH);
(4)DNA印迹技术( DNA blotting );
(5)单核苷酸多态性(SNP);
(6)连接酶链反应(LCR);
(7)基因芯片技术(gene chip)。
分子诊断的主要技术有核酸分子杂交、聚合酶链反应和生物芯片技术。
1.核酸分子杂交技术 具有一定互补序列和核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔合成异质双链的过程,称为核酸分子杂交。杂交的双方是待测核酸序列和探针序列。应用该技术可对特定DNA或RNA序列进行定性或定量检测。
2.聚合酶链反应(即Polymerase chain reaction,PCR)[3] 原理:PCR是模板DNA,引物和四种优艾设计网_设计脱氧核糖核昔三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下发生酶促聚合反应,扩增出所需目的DNA。包括三个基本步骤:双链DNA模板加热变性成单链(变性);在低温下引物与单链DNA互补配对(退火);在适宜温度下TapDNA聚合酶催化引物沿着模板DNA延伸。
3.生物芯片技术是近年发展起来的分子生物学与微电子技术相结合的核酸分析检测技术。最初的生物芯片技术主要目标是用于DNA序列测定、基因表达谱鉴定和基因突变体检测和分析,所以又称为DNA芯片或基因芯片技术。由于目前这一技术已扩展至免疫反应、受体结合等非核酸领域,出现了蛋白质芯片、免疫芯片、细胞芯片、组织芯片等,所以改称生物芯片技术更符合发展趋势。


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