为什么Westblot显示的条带很窄？？

我做wb显示的条带都很浅，为什么会这样，有人跟我一样么优艾设计网_Photoshop交流？

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抚松乾隆 2021-10-12 02:18

优艾设计网_PS论坛
样品条带很浅原因很多，可能原始蛋白的浓度掌握不是很好，上样很稀这样是个很重要的原因。此外在赋予一抗的时候最好4度过夜，温度太高非特异性结合会变多，导致后期背景较黑。另外在洗涤NC膜或PVDF膜应采用PBST或TBST缓冲溶液，这样可以促进抗体和表位的特异结合。

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钟琦 2021-10-12 02:25

可能因为胶凝的不均匀，聚合的不是很好，灌胶的时候尽量混匀。
可能是你样品的问题，如果盐浓度较高，便会挤压其它条带，致使条带宽窄不一，由于同样的原因，样品在凝胶中的速度会很慢，造成条带走的较慢，好像与你的预想不一致。
常见的原因是：每优艾设计网_设计客孔上样量不均匀，应确保每孔中上样量一致。
可能是系统的pH出了问题，有可能是你的电极缓冲液，也有可能是凝胶缓冲液，更新缓冲液看看，看是否能成功。

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