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ELISA实验结果为什么不稳定??


最近实验室在检测一个抗体的效价,结果一直优艾设计网_设计百科不稳定,波动很大
袁汝高 优艾设计网_设计客 2021-10-04 13:03


ELISA是目前国内临床检验科室最为常用的免疫检验方法,常用于一些重要检测项目如传染病或感染性疾病病原体的抗原和特异抗体、肿瘤标志物等常规检测,其检测结果的精准度直接影响到临床诊断、治疗检测和预后评估。
临床医学实验室常用ELISA测定的项目有:HBsAg、HBeAg、抗-HCV、抗-HBs、梅毒抗体、特异lgM抗体、抗-HBe和抗-HBc等,大多采用双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、捕获法以及竞争抑制法等。但由于ELISA测定的环节较为烦琐,尤其是加样、温育以及洗板等环节在实际操作过程中更要格外谨慎,稍稍有一点马虎或者不符合规范就会影响结果的准确性。
要保证检测结果的精准度,实现在不同实验室间检验结果的一致性,检验结果必须要有溯源性。检验结果能否实现溯源性,取决于检测系统,即完成检测所需要的仪器、试剂、校准品和操作程序的组合。一直以来,我国政府对ELISA检测的相关传染病十分重视,如艾滋病、梅毒等,但是在ELISA标准化方面所做的工作还不足。这就导致了检测结果容易出现假阳性、假阴性,大大降低了治疗质量,也损害了人民群众的身体健康,给患者和医疗机构造成了不可估量的损失。


fhjjhyb5454584 2021-10-04 13:08

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加样的准确性对你的结果影响很大。用排枪时,装好枪头后可以先吸一下看看各个枪头的吸液量是否一致,最好用手逐个拧一下;一般来说加样时用单枪加,加二抗和显色剂A、B时用排枪影响不大。


凉兮Armani 2021-10-04 13:15

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由于ELISA实验灵敏度很高,所以即使是平行孔也很容易出现较大误差。以我的你经验来看做这类实验(比方说QPCR)最好用灵敏度进口的枪配合吸附较小的枪头完成比较好。如果有排枪帮助那样会减小不少误差。这类实验还是需要一些动作的稳定性的。


S.W.A.T._103 2021-10-04 13:15


影响ELISA实验结果的原因有很多。(1)移液枪的准确度如何?如果移液枪的有较大的误差则会使每次的吸取的试剂尤其是抗原抗体不一致,导致两次结果的相差较大。(2)抗原抗体的保存条件是否准确?作为蛋白不可反复冻优艾设计网_Photoshop论坛融,以免有效结合位点变化。(3)检查一下洗涤步骤,如果洗涤不干净,会影响结果。
您可以说的再清楚一点,比如怎么操作,数据怎样。这样我们好根据具体情况来分析。


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