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PCR中如何计算引物的Tm值??

_WeCh****202654 优艾设计网_设计百科 2021-08-12 04:07


直接计算 ™=2(A+T)+4(G+C)
或是用软件来计算 公式计算的肯定没问题的


_WeCh****667517 优艾设计网_PS百科 2021-08-12 04:12


常用的公式是Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T),基本还是很准确的,另外你在订购引物的时候,会有引物合成单的,上面也会标明引物的Tm的,上面的更为准确的。


qkoufu5308 2021-08-12 04:13

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使用最邻近法并结合 SantaLucia 1998 热力学参数表和 Schildkraut 1965盐浓度校正公式所预测的Tm值最接近实测数据。最邻近法是最准确的Tm值预测方法,而且当PCR引物的GC含量越接近于50%时,其预测准确率越高。张艳春_2011_DNA解链温度_Tm_不同预测方法的比较.pdf2014-10-24 3 0分享 新浪微博 qq空间 微信

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Tm值就是DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系。引物设计软件都可以给出Tm,引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度有关。
长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)
对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:
Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/size


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