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定点转基因技术具体怎么操作??


基因组编辑技术可以实现三种基因组改造的目的,即基因敲除,特异突变的引入和定点转基因,有谁了解定点转基因技术具体操作过程优艾设计网_设计客
cuiyu1989 2021-08-02 06:23


可以做3种定点转基因修饰。
1、基因敲除:如果想使某个基因的功能丧失,可以在这个基因上产生DSB,NHEJ修复的过程中往往会产生DNA的插入或删除(indel),造成移码突变,从而实现基因敲除。

2、特异突变引入:如果想把某个特异优艾设计网_PS交流的突变引入到基因组上,需要通过同源重组来实现,这时候要提供一个含有特异突变同源模版。正常情况下同源重组效率非常低,而在这个位点产生DSB会极大的提高重组效率,从而实现特异突变的引入。

3、定点转基因:与特异突变引入的原理一样,在同源模版中间加入一个转基因,这个转基因在DSB修复过程中会被拷贝到基因组中,从而实现定点转基因。通过定点转基因的方法可以把基因插入到人的基因组AAVS1位点,这个位点是一个开放位点,支持转基因长期稳定的表达,破坏这个位点对细胞没有不良影响,因此被广泛利用。


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