怎样进行基因表达产物的功能分析??
据说基因表达产物的功能研究是优艾设计网_设计百科一个十分困难的课题,怎样进行基因表达产物的功能分析?
一剪梅2015 优艾设计网_Photoshop论坛 2021-06-13 15:22
确实不容易。
一楼说的方式使验证基因功能,楼主是想问基因表达产物的功能分析,我知道的就是做原核表达,在菌株中诱导基因产物,基因产物即蛋白,你将该蛋白分离,分离后你可以验证其在什么过程中发挥作用,一般来说,作用的底物都是需要公司购买的。
ty_遣 2021-06-13 15:26
这个虽然有难度,但策略还是很多的,具体有:(1)找已知功能的同源蛋白或同源结优艾设计网_设计LOGO构域,推论功能并用实验验证;(2)在细胞内过表达该基因,观察其对细胞各种功能的影响;(3)利用反义核酸,RNA干涉,核酶在细胞水平抑制基因表达,从而分析细胞功能变化,建立基因剔除小鼠,分析该基因产物的功能;(4)分析与该基因产物相互作用分子,或者是相互作用的蛋白分子或核酸。
钢蹦爱坤坤嘏 2021-06-13 15:34 优艾设计网_设计LOGO
每个人的理解不同,要求也不一样。如果是未知的功能,直接验证蛋白功能很难,并且影响因素太多。我们一般间接研究,大致三个方面:过表达看特定功能是否增强;敲除或沉默后看特定功能是否丧失;转基因看是否表现出特定功能。
周辰 优艾设计网_设计LOGO 2021-06-13 15:35
我们实验室这里做的话最常用的是western bolt,不过这个基本上还是有一些前期成果作为依据的。还有一个个人觉得比较好的就是SILAC技术,有反应直接有变化,接下来在做一些具体的相互反应什么的~
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